無(wú)菌實(shí)驗室日常管理要求
為維護無(wú)菌實(shí)驗室的潔凈度不受影響,無(wú)菌實(shí)驗室應制定質(zhì)量管理標準,并設專(zhuān)人負責無(wú)菌間的定期環(huán)境監測工作相關(guān)要求大至如下:
1.無(wú)菌室應設有無(wú)菌操作間和緩沖間,無(wú)菌操作間潔凈度應達到10000級,室內溫度保持在20-24℃,濕度保持在45-60%。超凈臺潔凈度應達到100級。
2.工作人員進(jìn)入無(wú)菌室前,必須用肥皂或消毒液洗手消毒,然后在緩沖間更換專(zhuān)用工作服,鞋,帽子,口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭雙手),方可進(jìn)入無(wú)菌室進(jìn)行操作。
3.無(wú)菌室使用前必須打開(kāi)無(wú)菌室的紫外燈輻照滅菌30分鐘以上,并且同時(shí)打開(kāi)超凈臺進(jìn)行吹風(fēng)。操作人員進(jìn)入無(wú)菌室應關(guān)掉紫外燈;
4.人員進(jìn)入無(wú)菌室要穿無(wú)菌衣、帽、口罩和專(zhuān)用鞋,非工作人員不得隨意進(jìn)入;
5.無(wú)菌室應備有工作濃度的消毒液,如5%的甲酚溶液,70%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液等。
6.無(wú)菌室內配備紫外燈進(jìn)行空氣消毒,應定期用適宜的消毒液(70%酒精或0.2%新潔爾滅)滅菌清潔,以保證無(wú)菌室的潔凈度符合要求。
7.無(wú)菌室應保持清潔,嚴禁堆放雜物,以防污染。每日進(jìn)行濕式小掃除,每周進(jìn)行大掃除,每月進(jìn)行空氣和實(shí)驗臺表面的細菌學(xué)檢測,各項指標控制在最低標準,符合無(wú)菌室的技術(shù)要求。
8.嚴防一切滅菌器材和培養基污染,已污染者應停止使用。
9.需要帶入無(wú)菌室使用的儀器、器械、平皿等一切物品,均應包扎嚴密,并應用適宜的方法滅菌。
10.供試品在檢查前,應保持外包裝完整,不得開(kāi)啟,以防污染。檢查前,用70%的酒精棉消毒外表面。
11.無(wú)菌間內應保持清潔。操作完畢,應及時(shí)清理無(wú)菌室,用2%-3%煤酚皂溶液消毒,擦拭工作臺面,不得存放與實(shí)驗無(wú)關(guān)的物品。再用紫外燈輻照滅菌。需30W紫外燈,距離在1.0m處,照射時(shí)間不少于30min,使用紫外燈,應注意不得直接在紫外線(xiàn)下操作,以免引起損傷,燈管每隔兩周需用酒精棉球輕輕擦拭,除去上面灰塵和油垢,以減少紫外線(xiàn)穿透的影響。
12.處理和接種食品標本時(shí),進(jìn)入無(wú)菌間操作,不得隨意出入,如需要傳遞物品,可通過(guò)小窗傳遞。
13.無(wú)菌室應每月檢查菌落數。在超凈工作臺開(kāi)啟的狀態(tài)下,取內徑90mm的無(wú)菌培養皿若干,無(wú)菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的營(yíng)養瓊脂培養基約15ml,放至凝固后,倒置于30~36℃培養箱培養48小時(shí),證明無(wú)菌后,取平板3~5個(gè),分別放置工作位置的左中右等處,開(kāi)蓋暴露30分鐘后,倒置于30~36℃培養箱培養48小時(shí),取出檢查。100級潔凈區平板雜菌數平均不得超過(guò)1個(gè)菌落,10000級潔凈室平均不得超過(guò)3個(gè)菌落。如超過(guò)限度,應對無(wú)菌室進(jìn)行徹底消毒,直至重復檢查合乎要求為止。
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